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Bst DNA Polymerase, Large Fragment(with dNTP)

Bst DNA Polymerase, Large Fragment(with dNTP)

更新時間:2024-11-03

訪問量:723

廠商性質:生產廠家

生產地址:廣東環凱微生物

簡要描述:
Bst DNA Polymerase, Large Fragment(with dNTP)用于微量(納克量)DNA 模板的快速測序

產品名稱:Bst DNA Polymerase, Large Fragment(with dNTP)
中文名稱:Bst DNA聚合酶,大片段(with dNTP)

產品編號與包裝規格:

編號產品名稱規格產品介紹產品價格
HKE015-01ABst DNA Polymerase, Large Fragment(with dNTP)800UBst DNA聚合酶,大片段 

 

產品描述:Bst DNA聚合酶大片段是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分,來源于E.coli菌株。利用基因重組技術,在大腸桿菌中進行表達后經多次純化分離而得。該酶具有5′→3′DNA聚合酶活性, 但不具有5′→3′外切核酸酶活性。本制品可應用于DNA測序、DNA 標記和等溫DNA擴增等。

產品特點:
      鏈置換活性強。
      高靈敏度。
      樶佳活性溫度為 65℃,恒溫擴增,無需熱循環儀。

產品用途:
      1)富含 GC 序列的 DNA 序列測定;
      2)微量(納克量)DNA 模板的快速測序;
      3)隨機引物 DNA 標記;
      4)雙鏈 DNA 5'突出端補平法標記;
      5)可用于等溫 DNA 擴增,如環介導等溫擴增(LAMP),全基因組擴增(WGA),解旋酶恒溫基因擴增(HDA)等。

應用實例:圖例)Bst DNA 聚合酶大片段用于LAMP 實驗,以 M13 ssDNA 為模板, 以 F3/B3,FIP/BIP 為引物,65℃反應1 小時后,進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。

泳道M:1kb DNA Ladder ;
泳道 1:LAMP 擴增產物。

反應體系(25μL)如下:

10×Bst LF Buffer2.5μL
F3/B30.2μM(終濃度)
FIP/BIP0.8μM(終濃度)
甜菜堿1M(終濃度)
dNTPs400μM(終濃度)
M13 ssDNA 模板2μL
Bst DNA 聚合酶Large Fragment1μL(8U)
ddH2O至 25μL

 

保存溫度:-20℃。

產品包裝(A 包裝):

質量保證:經多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶,qPCR 方法檢測無大腸桿菌 DNA 殘留,無核酸內、外切酶污染。

活性定義:65℃條件下,30分鐘內使10nmol的dNTPs摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個活性單位。

10×反應緩沖夜:200mM Tris-HCl,100mM (NH4)2SO4,500mM KCl,20mM MgSO4,1% Tween 20,pH8.8。

保存體系:50 mM KCl,10 mM Tris-HCl (pH 7.5),1mM DTT, 0.1 mM EDTA,0.1% Triton X-100 和 50% Gly1cerol。

反應條件:1×反應緩沖夜,65℃溫浴。

熱失活:80℃,10 分鐘。

注意事項:
      1)Bst DNA 聚合酶不具有 3′→5′外切酶活性;
      2)長期貯存需加入 100μg/mL BSA 或 0.1% Triton X-100;
      3)建議反應溫度不要超過 70℃;
      4)Bst DNA 聚合酶不能用于熱循環測序或PCR。

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