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技術資料 干粉培養基配制操作方法
發布時間: 2019-10-10 點擊次數: 4619次技術資料 干粉培養基配制操作方法
1、準備好干粉培養基、三角瓶、藥勺、無菌平皿、油性筆等。首先在瓶身上標注好培養基的
相關信息。?
2、將三角瓶置于電子天平上,調零。按照需要用量,用藥勺把干粉培養基添加到三角瓶中。
3、稱量之后及時蓋上培養基瓶蓋,擰緊。用量筒量取適量的蒸餾水或者去離子水。
4、先加入小部分水以濕潤干粉,避免粉塵揚起。再加入剩余的水量。充分搖勻。
5、將培養基加熱煮至沸騰三次,應可見溶液澄清透亮,無明顯瓊脂顆粒掛壁,分層等現象。
6、塞上透氣硅膠塞,包上牛皮紙或者報紙,包扎好。放入高壓滅菌鍋中滅菌。(按需設定滅
菌溫度、時間)
?7、暫時不使用的培養基,可以放入50℃烘箱或者水浴中保溫。倒平板時,在超凈工作臺或
生物安全柜中準備好無菌平皿、記號筆等。8、拆開包裝后,將無菌培養皿倒置,在底部邊緣寫上平板相關信息。
9、將標記好的無菌平皿翻轉過來,當培養基溫度下降到50℃左右時,傾倒培養基。
10、倒完后可輕輕圓周搖晃平板三圈,使平板邊緣整齊。將平板鋪開可加速瓊脂冷卻凝固。
11、使用之前,將平板倒置于無菌實驗室內的烘箱中,55℃、15 分鐘。烘干平板表面水分。
12、將暫時不使用的平板用報紙包成筒狀,用記號筆標清楚平板的種類、配制日期。
13、然后放進2-8℃的冰箱中保存。用時取出放置室溫下平衡,使用前50℃烘箱烘10 分鐘。
14.注意事項
(1)培養基在滅菌之前,應該充分煮沸至溶液澄清透明無瓊脂掛壁。
(2)配制量不要超過容器上*的2/3。盡量使用玻璃器皿配制。不要使用銅、鐵等容器
(3)在烘箱中干燥的平板不要超過15 分鐘
(4)新鮮自制的平板,可以在2-8℃下保存不得超過2 個星期。
(5)在冰箱中保存,平板不要靠近冰箱冷凝管,避免凍壞。取出平衡至室溫后瓊脂有泌水現象,屬于正
常,應在烘箱中干燥后再使用。
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